启动反应与结果分析确认参数无误后,启动 qPCR 程序,仪器自动运行并实时显示荧光曲线。反应结束后,通过软件查看结果:定量结果:根据标准曲线计算未知样本的初始模板浓度(定量),或通过 ΔΔCt 法分析相对表达量(相对定量)。溶解曲线:若出现单一尖锐峰,说明扩增特异性良好;若有杂峰,需排查引物或反应条件问题。 污染防控(重点)核酸污染:严格分区操作:将试剂配制区、样本处理区、PCR 扩增区分开,避免交叉污染。使用滤芯吸头,每次加样后更换吸头,避免移液器接触样本或试剂瓶口。定期用 10% 次氯酸钠或 DNA 酶清洁实验台面、移液器和仪器样品槽,紫外灯照射消毒操作区(30 分钟以上)。试剂污染:试剂分装保存(避免反复冻融),阴性对照(无模板)和空白对照(无菌水)必须设置,以监测是否污染。RePure系列PCR仪能快速找到合适的退火温度,显著提高了实验的成功率和可靠性。江苏48孔基因扩增仪PCR仪厂家
转基因作物检测应用:扩增转基因作物中的外源基因(如抗虫基因Bt、抗除草剂基因EPSPS),用于安全性评估和监管筛查。案例:欧盟法规要求对食品中的转基因成分进行 PCR 定性检测。2. 作物育种与品种鉴定应用:利用 SSR(简单序列重复)、AFLP(扩增片段长度多态性)等分子标记技术,辅助选育抗病、抗逆品种,或鉴定种子纯度。案例:通过 PCR 扩增特定品种的特征性 DN**段,区分杂交种与常规种。3. 畜禽疫病检测应用:检测动物病原体(如非洲猪瘟病毒、禽流感病毒)的核酸,用于疫病防控和检疫。无锡32孔基因扩增仪PCR仪经销商柏恒RePure系列PCR仪在扩增效果上表现出色,能够准确、可靠地扩增目标DNA序列。
温度与反应体系控制温度准确性:定期校准仪器(由专业人员进行),确保变性、退火温度精细(偏差超过 ±0.5℃会影响结果)。体系一致性:加样时确保各孔反应体积一致(误差≤1μL),避免因体积差异导致 Ct 值偏差。避免气泡:加样后若有气泡,需轻轻敲击板壁或离心去除,否则气泡会干扰荧光信号采集。3. 试剂与样本处理酶的保存:qPCR Mix 需 - 20℃冷冻保存,使用时冰上融化,轻轻混匀(勿震荡,防止酶变性)。模板质量:避免模板中含 EDTA、SDS 等抑制剂,若样本浓度过低,可适当增加模板量(但需注意体积占比,避免影响反应体系)。
科研与分子生物学基因表达谱分析应用:通过 RT-PCR 同时检测多个基因在不同样本中的表达差异(如**组织芯片研究)。高通量测序文库制备应用:扩增 DN**段用于二代测序(NGS)建库,提升测序前处理效率。3. 农业与生物技术转基因作物批量检测应用:同时筛查多种作物样本的外源基因(如抗虫基因Bt),符合监管机构的高通量检测需求。畜禽疫病快速筛查应用:批量检测生猪、禽类的病原体(如非洲猪瘟病毒、禽流感病毒),助力养殖场疫病防控。柏恒RePure系列PCR仪具有优越的扩增效果,可靠地放大目标DNA序列,保证实验结果的准确性和可重复性。
定性基因扩增仪(PCR 仪)通过对目标 DN**段的特异性扩增,实现对基因的定性检测(如判断是否存在特定基因或病原体)。其主要应用场景涵盖科研、医疗、农业、司法等多个领域,具体如下:1. 基因克隆与功能研究应用:通过 PCR 扩增目的基因片段,插入载体后转入宿主细胞,用于基因功能验证、蛋白表达分析等。案例:在**研究中,扩增抑*基因(如TP53)或*基因(如KRAS),分析其突变与**发生的关系。2. 基因表达分析应用:结合逆转录 PCR(RT-PCR),检测 mRNA 的表达水平,研究基因在不同组织、发育阶段或处理条件下的差异表达。案例:分析药物处理后细胞中凋亡相关基因(如Bcl-2、Bax)的表达变化。3. 遗传变异检测应用:扩增特定基因区域,检测单核苷酸多态性(SNP)、插入 / 缺失(Indel)等变异,用于群体遗传学、进化生物学研究。案例:通过 PCR-RFLP(限制性片段长度多态性)技术分析不同物种的基因多态性。RePure-T三槽仪器采用了多重保护机制,有效防止过热和其他潜在的故障。江苏荧光基因扩增仪PCR仪品牌
光学系统可以确保高灵敏度和高特异性,适用于各种基因表达分析、病原体检测和 SNP 分型等应用。江苏48孔基因扩增仪PCR仪厂家
微量检测:PCR 仪具有强大的信号放大能力,能够将样本中极其微量的转基因 DNA 模板进行大量扩增。即使样本中*含有少量的转基因成分,经过多轮的 PCR 循环,也能使目标基因片段的数量呈指数级增长,达到可检测的水平。通常可以检测到样本中低至 pg 级甚至 fg 级的转基因 DNA,能够满足对各种复杂基质中微量转基因成分的检测需求。早期监测:这种高灵敏度使得 PCR 仪能够在转基因成分含量极低的早期阶段就进行有效检测,对于及时发现和监控转基因生物的扩散、污染等情况具有重要意义,有助于采取相应的措施进行防控和管理。江苏48孔基因扩增仪PCR仪厂家