放入 PCR 仪:将配置好的反应管放入基因扩增仪 PCR 仪中,按照设定的程序进行扩增反应。设置扩增程序:一般包括预变性、变性、退火、延伸和终延伸等步骤。预变性步骤通常在 94℃-95℃下进行 5-10 分钟,使 DNA 双链充分解开;变性温度一般为 94℃-95℃,时间为 30-60 秒,使模板 DNA 双链解链;退火温度根据引物的 Tm 值确定,一般在 50℃-65℃之间,时间为 30-60 秒,使引物与模板 DNA 特异性结合;延伸温度通常为 72℃,时间根据扩增片段长度而定,一般为 1-2 分钟 /kb;终延伸步骤在 72℃下进行 5-10 分钟,确保所有扩增产物延伸完整。循环次数一般为 30-40 次。RePure-(D)B的双槽设计能够满足同时进行不同PCR反应的需求,减少实验时间和成本。南京基因扩增仪PCR仪厂家
启动反应与结果分析确认参数无误后,启动 qPCR 程序,仪器自动运行并实时显示荧光曲线。反应结束后,通过软件查看结果:定量结果:根据标准曲线计算未知样本的初始模板浓度(定量),或通过 ΔΔCt 法分析相对表达量(相对定量)。溶解曲线:若出现单一尖锐峰,说明扩增特异性良好;若有杂峰,需排查引物或反应条件问题。 污染防控(重点)核酸污染:严格分区操作:将试剂配制区、样本处理区、PCR 扩增区分开,避免交叉污染。使用滤芯吸头,每次加样后更换吸头,避免移液器接触样本或试剂瓶口。定期用 10% 次氯酸钠或 DNA 酶清洁实验台面、移液器和仪器样品槽,紫外灯照射消毒操作区(30 分钟以上)。试剂污染:试剂分装保存(避免反复冻融),阴性对照(无模板)和空白对照(无菌水)必须设置,以监测是否污染。江苏双槽基因扩增仪PCR仪一般多少钱柏恒RePure系列PCR仪在扩增效果方面表现优异,具有高灵敏度和稳定性,能够实现快速、高效的DNA扩增。
PCR仪是利用聚合酶链式反应(PCR)技术,在体外对特定DNA片段进行大量扩增的仪器。其原理是通过高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增。具体过程如下:高温变性:将待扩增的DNA双链在高温(90-95℃)下解链,形成单链DNA模板。低温退火:降低温度(一般为50-65℃),使引物与单链DNA模板特异性结合。适温延伸:在DNA聚合酶的作用下,以引物为起始点,在适宜温度(一般为72℃左右)下,以dNTP为原料,沿着模板链合成新的DNA链。
性能指标温度控制准确性:指样品孔温度与设定温度的一致性,直接关系到实验的成败,一般要求温度准确性在±0.1℃-±0.2℃之间。均匀性:指样品孔间的温度差异,关系到不同样品孔进行反应结果的一致性,良好的温度均匀性可使实验结果更具重复性,通常温度均匀性应在±0.2℃-±0.5℃范围内。升降温速度:更快的升降温速度可以缩短反应时间,提高实验效率,同时减少非特异性结合的机会,一般PCR仪的升降温速率在3℃/s-6℃/s左右。模块规格:常见的有96孔、48孔、32孔等,可根据实验需求选择合适的模块规格。此外,一些PCR仪还兼容0.2ml、0.5ml管以及96标准微孔板等不同类型的反应容器。程序设置:包括可记忆程序数目、比较大程序段数、比较大温阶步数、比较大循环次数、比较大保温时间等。丰富的程序设置功能可以满足不同实验的需求。RePure-(D)B梯度功能的应用可有效减少实验中的试错次数,节省实验时间。
司法与法医鉴定DNA 数据库构建应用:同时扩增 96 份血样的 STR 位点(如 CODIS 系统中的 13 个**位点),加速犯罪现场样本比对。亲子鉴定批量处理应用:法医实验室通过 96 孔板同步处理多个家庭的样本,缩短鉴定周期。5. 食品与环境安全食品微生物高通量检测应用:同时检测多批次食品中的致病菌(如沙门氏菌、李斯特菌)或过敏原基因(如花生过敏原)。环境微生物群落分析应用:扩增土壤 / 水样中的微生物 16S rRNA 基因,批量构建微生物多样性文库。Q9604还具备数据管理和分析软件,可以快速生成实验报告,方便进行数据的分析与共享,促进合作研究的开展。南京QPCR基因扩增仪PCR仪品牌
杭州柏恒荧光定量PCR仪Q9604是一款高性能的实验室设备,专注实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)解决方案。南京基因扩增仪PCR仪厂家
96 孔 PCR 仪是一种基于聚合酶链式反应(PCR)技术的仪器,通过 96 孔反应板实现一次性处理 96 个样本的基因扩增,适用于高通量检测场景。其设计**是通过精确控温(加热、冷却、恒温)实现 DNA 的变性、退火、延伸循环,广泛应用于科研、临床、农业、司法等领域。临床与医学检测大规模病原体筛查应用:、流感病毒、HPV 等传染病的批量检测(如医院检验科、疾控中心)。案例:**期间,96 孔 PCR 仪配合自动化移液工作站,单日可完成数千份样本的核酸提取与扩增。遗传疾病批量诊断应用:同时检测多个样本的致病基因突变(如地中海贫血、脊髓性肌萎缩症)。南京基因扩增仪PCR仪厂家