在荧光定量PCR实验中，常用的荧光探针有荧光素和罗丹明。这些荧光探针通常由两个部分组成：一个是报告基团，另一个是淬灭基团。在未进行PCR反应时，报告基团和淬灭基团之间的距离较远，因此不会发生荧光能量共振转移（FRET）作用，也就没有荧光产生。当PCR反应开始后，随着DNA片段的不断扩增和积累，荧光探针会逐渐结合到DNA片段上，并随着DNA片段的不断延伸而逐渐释放出报告基团。此时，报告基团和淬灭基团之间的距离会逐渐减小，从而会发生荧光能量共振转移（FRET）作用，产生荧光信号。通过实时监测荧光信号的强度和变化，可以实现对特定DNA片段的定量和分析。在进行荧光定量PCR实验时，需要注意荧光探针的浓度和比例，以及PCR反应条件和程序的设计和优化，以确保实验的高效和准确性。同时，还需要注意探针的特异性和灵敏度，以确保实验结果的准确性和可靠性。 RePure-(D)B梯度功能的应用可有效减少实验中的试错次数，节省实验时间。南京48孔基因扩增仪PCR仪

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