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Recombinant Biotinylated Human TIGIT Protein

来源: 发布时间:2024-10-03

重组Exendin-4是一种基于Exendin-4的重组蛋白,Exendin-4是一种从墨西哥蜥蜴(Gilamonster)的毒液中分离出来的39个氨基酸的多肽。它与胰高的血糖素样肽-1(GLP-1)具有53%的序列同源性,并与相同的膜受体相互作用。重组Exendin-4在体内增强依赖葡萄糖的胰岛素分泌,抑制不适当的高胰高的血糖素分泌,并减慢胃排空。它还在体外和动物模型中促进β细胞增殖和新生。重组Exendin-4是通过大肠杆菌表达的合成DNA序列编码的39个氨基酸的Exendin-4。重组Exendin-4的特点包括:-分子量约为4.2kDa,是一个非糖基化的单一多肽链,包含39个氨基酸。-具有调节血糖水平、减少胰岛素抵抗、降低胰高的血糖素、降低糖化血红蛋白(HbA1c)和刺激β细胞生长以促进胰岛素产生等多种生物活性。-通常以冻干粉的形式提供,需要在无菌条件下用无菌蒸馏水或含有0.1%BSA的水溶液复溶。-纯度高于96%,通过SDS-PAGE和HPLC分析确定。-内毒的素含量低于10EU/mg,通过LAL方法测定。在实验中,可以通过以下方法来优化重组Exendin-4的荧光特性:1.选择合适的激发和发射波长。2.优化激发和发射滤光片。3.评估荧光量子产率。4.调整缓冲液条件,包括pH值和离子强度。5.控制温度和氧浓度。将含有重组质粒的表达载体转化到宿主细胞中,通常是大肠杆菌或其他合适的细胞系。Recombinant Biotinylated Human TIGIT Protein,His-Avi Tag

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在蛋白质糖基化分析中,除了N-糖苷酶F(PNGaseF),还有其他几种酶也发挥着重要作用,具有各自的优势:1.**EndoH糖苷内切酶H**:这种酶可以水解高甘露糖型N-连接糖链,通常用于区分高甘露糖型和复杂型糖链。2.**EndoS糖苷内切酶S**:EndoS能够从IgG重链的壳二糖结构之间切除N-连接糖,有助于分析抗体的糖基化模式。3.**FastPNGaseF**:这是一种经过优化的PNGaseF,能在数分钟内对抗体、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白进行彻底和快速的去糖基化,简化了实验流程,同时保持了灵敏度和重复性。4.**O-糖苷酶O-glycosidase**:用于去除O-连接的糖链,这对于O-糖基化蛋白质的分析至关重要。5.**三氟甲基磺酸(TFMS)法**:这是一种化学去糖基化方法,可以用于释放糖链,尤其在某些难以使用酶法去除糖链的情况下。6.**质谱法**:虽然不是酶,但质谱法是分析糖链结构的强大工具,可以结合酶法或化学法释放的糖链进行详细分析。7.**核磁共振法(NMR)**:NMR技术可以确定糖链的构型、连接位置、分支和微观多样性,是糖链立体化学结构分析的重要方法。这些酶和方法各有优势,可以根据实验的具体需求和糖基化类型的不同进行选择,以获得比较好的分析结果。

Recombinant Human HMGB1(His Tag)UBE2L3作为泛素化途径中的关键酶,其在蛋白质降解、信号传导、细胞周期控制等重要内容有着作用。

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通过EndoS糖苷内切酶S进行糖蛋白的糖链结构分析通常涉及以下步骤:1.**样本准备**:首先,需要获得糖蛋白的纯化样本,以确保分析的准确性。2.**酶的准备**:准备适量的EndoS糖苷内切酶S,根据实验需要选择合适的浓度和缓冲体系。3.**酶切反应**:-将糖蛋白样本与EndoS酶混合,在适宜的条件下(如pH、温度等)进行酶切反应。-反应时间根据EndoS的活性和所需的切割程度来确定。4.**终止反应**:在达到预期的酶切时间后,通过加热或添加适当的缓冲液来终止酶切反应。5.**分离纯化**:-使用色谱技术(如凝胶渗透色谱、离子交换色谱等)将酶切后的糖蛋白和释放的糖链分离。-纯化过程可能需要多步色谱以确保糖链的纯度。6.**糖链分析**:-对分离得到的糖链进行进一步的结构分析,可能包括质谱分析、核磁共振(NMR)波谱分析等。-可以使用高分辨率的质谱技术,如MALDI-TOF或ESI-MS,来确定糖链的精确质量。7.**序列鉴定**:通过与已知糖链数据库比对,确定糖链的序列和结构。8.**功能分析**:研究酶切后的糖蛋白和释放的糖链对生物活性的影响,如结合特性、免疫原性等。9.**数据分析**:收集所有数据并进行综合分析,以揭示糖链结构与功能之间的关系。

大肠杆菌表达的重组抑肽酶(Aprotinin)是一种通过基因工程技术在大肠杆菌中生产的蛋白酶抑制剂,具有以下特性和应用:1.**来源**:重组抑肽酶是通过大肠杆菌(E.coli)表达系统生产的,确保了无动物源性成分,减少了病毒污染的风险。2.**结构**:它是一种单体球状蛋白,由58个氨基酸组成,具有三个交联二硫键的单个多肽链。3.**功能**:作为一种竞争性、可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,重组抑肽酶能够抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、激肽释放酶和血纤维蛋白溶酶等的活性。4.**应用**:在生物技术过程中,重组抑肽酶可以替代动物源性抑肽酶,用于重组蛋白生产中抑制丝氨酸蛋白酶的活性,以及在细胞培养等过程中。5.**产品信息**:通常以粉末形式提供,具有明确的货号和规格,如1mg或10mg的包装。6.**产品性质**:包括外观、溶解度、纯度、蛋白含量、酶浓度和活性定义等详细参数。7.**储存条件**:冻干粉在2~8℃保存,有效期为2年。8.**使用方法**:推荐的结合pH>6.0,在pH<3.0的条件下不结合,可直接使用0.9%NaCl溶解,溶解后可-20℃储存。9.**注意事项**:产品作科研用途,操作时需穿着实验服并佩戴一次性手套。Ultra-Long Master Mix 在分子生物学实验中的应用主要集中在需要扩增长片段DNA序列的场合。

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重组人血清白蛋白(rHSA)在药物载体应用中提高药物稳定性和靶向性的机制主要包括以下几点:1.**延长半衰期**:通过与rHSA融合,可以延长药物分子在体内的循环时间。例如,阿必鲁肽(Tanzeum)是GLP-1与HSA的融合蛋白,其半衰期可延长至5天,每周给药一次即可。2.**提高稳定性**:rHSA作为载体,可以保护药物分子不受体内酶解和其他降解因素的破坏,从而提高药物的稳定性。例如,FGF21与HSA融合后,其体外稳定性升,抗胰蛋白酶降解能力和高温条件下的稳定性增加。3.**改善药代动力学**:rHSA融合蛋白能够改善药物的药代动力学特性,如改变药物的分布和代谢,减少肾脏的损失,从而提高药物在体内的浓度和疗效。4.**增强靶向性**:rHSA可以通过其天然的生物学特性,如与特定受体的结合,增强药物对特定组织或细胞的靶向性。例如,rHSA可以通过其与FcRn受体的结合,实现对瘤组织的靶向性。5.**降低免疫原性**:rHSA作为一种内源性蛋白质,具有较低的免疫原性,可以减少药物引起的免疫反应,提高药物的安全性和耐受性。泛素蛋白的C末端通常通过酰胺键与靶蛋白的氨基团连接在一起,最常见的是与靶蛋白赖氨酸的ε氨基团相连。肠激酶

通过SDS-PAGE、Western blot、质谱等方法验证蛋白的纯度和分子量。通过活性测试评估蛋白的生物活性。Recombinant Biotinylated Human TIGIT Protein,His-Avi Tag

在基因编辑中,除了NLS-Cas9-EGFPNuclease,还有多种技术可以提高编辑的特异性,这些技术包括:1.**高保真Cas9变体**:通过工程化改造Cas9蛋白,例如使用SpCas9-HF1或eSpCas9等高保真变体,可以减少脱靶效应,提高特异性。2.**碱基编辑器(BaseEditors)**:这类编辑器可以在不产生DNA双链断裂的情况下直接在特定位置进行单个碱基的转换,从而减少非目标编辑。3.**引导编辑器(PrimeEditors)**:由哈佛大学刘如谦教授团队开发的引导编辑器可以在不依赖DNA双链断裂和同源定向修复的情况下,实现精细的基因组编辑。4.**CRISPRi和CRISPRa**:这两种技术分别用于抑制或激起特定基因的表达,而不切割DNA,从而减少了脱靶风险。5.**新型CRISPR系统**:例如CRISPR/Cas12j和CRISPR/CasΦ,这些系统可能具有不同的PAM序列要求和更高的特异性。6.**AI辅助设计**:利用人工智能预测和优化sgRNA的设计,以减少脱靶效应。7.**优化递送系统**:改进CRISPR组分的递送方法,例如使用核糖核的蛋白(RNP)复合物,可以提高编辑效率和特异性。8.转座子编辑系统:利用转座子进行基因组编辑,可以在不依赖DNA双链断裂的情况下实现大片段DNA序列的插入。

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