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来源: 发布时间:2025-05-25

可见光激发Ca2+荧光探针:与紫外光激发探针相比,可见光激发Ca2+探针具有更强的染料吸收性能,对Ca2+变化水平检测敏感度也更高,能够降低对活细胞的光毒性和样品自发荧光以及光散射的干扰,且无光谱偏移。较常使用的可见光激发Ca2+荧光探针有Fluo-3,Fluo-4,Rhod-2等,同时他们也都是非比率型指示剂。Fluo-3是较常用的可见光激发Ca2+荧光指示剂之一,是典型的的单波长指示剂,比较大激发波长为506nm,比较大发射波长为526nm。它与Ca2+结合之前几乎无荧光,结合后荧光会增加60至100倍,从而避免了细胞自身的荧光干扰。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右,发射波长为525~530nm(图3)。Fluo-3可以用在激光共聚焦显微成像或流式细胞仪中。它还有一个升级版本Fluo-4,在相同Ca2+浓度下信号更强。多种钙离子指示剂和钙成像手段的存在使研究人员能够根据具体的实验需要进行选择。深圳在体钙成像哪里有

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钙成像技术(calciumimaging)是指利用钙离子指示剂监测组织内钙离子浓度的方法。在神经系统研究方面,在在体(invivo)或者离体(invitro)实验中,钙成像技术被广泛应用于同时监测成百上千个神经元内钙离子的变化,从而检测神经元的活动情况)。有了钙成像技术,原本悄无声息的神经活动就变成了一幅斑斓闪烁的壮观影像,科学家终于可以亲眼看着神经信号在神经网络之中往来穿梭。因此,这种技术一出现,就受到了全世界神经科学家们的追捧,至今依然是人们观测神经活动直接的手段。光遗传钙成像生产厂家钙成像系统具有单细胞分辨率的大视野的特征。

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科学家利用钙成像技术记录大脑活动。随着功能光学成像技术的发展,神经学家们已经可以研究脑区和神经元内部的工作情况。功能钙成像技术就是其中之一,其主要原理是将外源性荧光信号和生理现象耦合起来——通过荧光染料信号的改变反映细胞内游离钙离子浓度,以此daibiao细胞的功能状态。目前它被广泛应用于实时监测一群相关神经元内钙离子的变化,从而判断其功能活动。该技术的出现使得科学家可以亲眼目睹神经信号在神经网络之中时间和空间上的传递穿梭。

钙成像的荧光指示剂钙成像的荧光探针一般均为Ca2螯合剂EGTA,APTRA,BAPTA的衍生物,它们可以结合钙离子从而显示一个光谱响应,使研究者可以用荧光显微镜来观察细胞内的自由钙的浓度。荧光显微镜可以使用普通的倒置荧光显微镜来进行钙信号的测定和成像。并可结合电生理设备、活细胞培养装置等,适用于大强度、广范围的钙信号测定。共聚焦显微系统,共聚焦以激光为光源,且可配备氩离子光源,可以选择可见光激发的钙指示剂,进行层扫,相比普通荧光显微镜有更好的空间分辨率。并且共聚焦除了配备大视野扫描镜更可配置共振扫描振镜,以满足更高速成像应用的需求。双光子显微系统使用长波长来激发荧光指示剂,具有较低的细胞毒性,也可适用于紫外激发的钙指示剂,且可获得和单光子共聚焦系统类似的空间分辨率。小结综上可见,在研究钙信号时,可结合样品自身特点来选择相应的钙指示剂,并考虑既有的实验设备,来确定具体的实验方案。同时还需进一步摸索实验数据的校正、控制等多种影响因素,可获得可靠的图像及荧光定量数据。钙成像技术能直接测量神经元和神经元组织中动态的钙流动。

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指示剂是如何负载细胞,目前有三种在神经元上填充钙离子指示剂的方法,且都可以用于体内和体外研究。第一种方法是利用玻璃吸管将膜渗透性盐或葡聚糖形式的指示剂注入单个神经元中。此方法方便实验者控制单个神经元内的钙离子指示剂浓度且信噪比较高。第二种是利用“批量加载”的方法将钙离子指示剂染料负载神经元,观察对象为一群神经元。尽管此方法可能导致一些胶质细胞也被指示剂所标记,但明显提高了整体神经元的标记百分比,使研究者得以观察到一群神经元内动作电位相关性的活动。第三种也较为常用,通过病毒转染的方式使其基因编码钙离子指示剂。细胞对钙离子有一套完备的监控系统以维持钙的内稳态平衡。细胞钙离子钙成像哪里买

通过钙成像技术发现神经元的活动与其内部的钙离子浓度密切相关。深圳在体钙成像哪里有

nVista神经元超微钙成像系统是可以在自由活动的动物上进行大范围的动态荧光成像的设备。通过nVist,您可以视觉化细胞活动,同步行为学,以及长期追踪神经环路的活动。nVista被应用于全球的研究机构中,产生了影响力的大数据库。主要特征:利用GCamp钙离子探针进行成像功能完整的数据采集软件,实现对焦,调焦,行为同步化单细胞分辨率下,可同时捕获成百上千神经元活动长时间追踪细胞,追踪时间可长达数月电子对焦,保证视野范围的恒定自由动物行为学:可运用标准行为学测量方法,行为操作箱,迷宫,旷场等可进行皮层,深部核团,以及脑干,中脑等区域的成像记录动物无需进行适应性训练钙离子成像+自由活动行为学1.锚定特殊细胞类型,例如特定的receptor/promotor/geneticmarker2.单细胞的空间分辨率,可以分析细胞在空间内的mapping和编码信息3.动物可在大范围的旷场内自由活动4.长时程追踪同一细胞的放电规律变化:用于学习,记忆,药物成瘾等研究。5.可对脑内的深部核团进行记录nVista神经元超微钙成像系统成像效果好。神经元超微钙成像系统技术参数专业的数据采集软件Inscopix数据采集软件可记录成百上千个神经元细胞。电子调焦功能,可通过软件实现物理调焦。深圳在体钙成像哪里有

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